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      細胞分離液的特點和操作注意事項你知道嗎?
      點擊次數:67 發布時間:2022-05-26
        細胞分離液除了可分離淋巴細胞外,更常用于胰島細胞的分離。胰島細胞的移植是一種有效的糖尿病新型療法,可解決特別是I型糖尿病患者的胰島細胞不足及功能低下的問題。
        細胞分離液特點:
        1、提供多種密度的Biocoll細胞分離液,可分離外周血,骨髓和臍帶血中的單個核細胞,低密度的基質細胞,間充質干細胞以及嚙齒動物的血細胞等。
        2、生產過程符合GMP以及美國藥典標準,無菌即用,內毒素含量低。
        3、分離效果好,所得細胞活性>80%,Ficoll可高壓滅菌,有效期長。
        細胞分離液操作步驟及注意:
        1、取全血,使用等量PBS稀釋。(全血:HBSS=1:1)
        2、取離心管,加入與血稀釋液等量的PBS于管底,將血液稀釋液小心加至PBS液面上層。(小心不要使兩種溶液混合,吸頭接近液面,貼壁緩慢加入,尤其是兩種溶液剛接觸到的時候,一定要慢!慢!再慢?。?/div>
        3、離心:800g,30min,需要將制動降至低,即離心機自然降速至0,離心完畢將得到如圖所示分層(一定要自然降速,或者只有1-2成的制動)
        4、吸取白膜層至新15mL離心管中。(白膜層為如圖所示部位,一定要小心的吸取,不要吸到血漿和下層的細胞分離液也不要將各層溶液攪混,吸取的時候可以先將上層血漿吸掉,這樣更好操作。)
        5、白膜層液體加10~15mlPBS離心,300g,10min,棄上清。沉淀再加PBS清洗一次,棄上清。
        6、沉淀加入正常培養的完全培養基進行培養,2~3小時,使單核細胞貼壁。
        7、鏡下觀察細胞貼壁后,更換培養基,去除未貼壁細胞,保留下來的即為所需的單核細胞。
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